Type C botulism in dogs from rural properties located in Goiânia, Brazil

Botulism is a disease usually fatal, caused by the ingestion of neurotoxins produced by Clostridium botulinum. In dogs, intoxication is caused by the ingestion of botulinum toxin type C, and animals often recover spontaneously. The present study describes the occurrence of type C botulism in two dogs domiciled on neighboring rural properties in the municipality of Goiânia, state of Goiás, Brazil, probably associated with ingestion of decomposing bovine carcass. Upon clinical evaluation, the dogs were alert in the lateral decubitus position with ascending flaccid paralysis, absence of eyelid reflexes, and reduced muscle tone. Due to their worsening clinical symptoms, the animals died within 12 h and 3 days after supportive treatment. Botulinum toxin type C was identified, in the serum and feces of both dogs, by seroneutralization in mice with homologous monovalent antitoxin. The results of the high-throughput gene sequencing showed that the abundance of C. botulinum in the fecal microbiota of one of the affected dogs was low (0.53%). In this way, the present study highlights the need of sanitary practices related to the appropriate collection and disposal of bovine carcasses in rural areas since they represent a risk factor for the occurrence of botulism in dogs domiciled on rural properties.

Persistent Idiopathic Dentoalveolar pain. Literature review and clinical case treated with intraoral application of Botulinum toxin / Dolor Idiopático Dentoalveolar Persistente (DIDAP). Revisión de literatura y caso clínico tratado con aplicación intraoral de toxina Botulínica

ABSTRACT: Persistent Idiopathic Dentoalveolar Pain (PIDAP) is an orofacial neuropathic pain, which can be difficult to diagnose and is usually accompanied by increasing anxiety from both the patient and the treating dentist. A case of a 38-year-old female patient is presented, and it is shown the diagnostic process and therapeutic approach. The interdisciplinary management accompanied by several pharmacological lines is highlighted: Botulinum toxin was used as an adjunctive treatment allowing it to decrease systemically administered medications dosing and therefore its possible side effects. This condition usually affects psychosocial aspects of the patient and has a major impact on his quality of life. It is very important before initiating an invasive clinical treatment, obtaining a clear differential diagnosis and assessing in some cases the presence of non-odontogenic pain, such as PIDAP.

RESUMEN: El Dolor Idiopático Dentoalveolar Persistente (DIDAP), es un dolor neuropático orofacial, que puede resultar difícil de diagnosticar y generalmente se acompaña de creciente angustia tanto de parte del paciente como también del odontólogo tratante. Se presenta un caso de una paciente femenina de 38 años en donde se demuestra el proceso diagnóstico y abordaje terapéutico. Se resalta el manejo interdisciplinario acompañado de varias lineas farmacológica: la toxina Botulínica se utilizó como tratamiento coadyuvante para disminuir la dosis de medicamentos administrados por vía sistémica y por ende sus posibles efectos secundarios. Esta condición habitualmente abarca aspectos psicosociales del paciente y tiende a verse sumamente afectada su calidad de vida. Es de suma relevancia antes de iniciar un tratamiento clínico invasivo, obtener un diagnóstico diferencial claro y valorar en algunos casos la presencia de dolor no ontogénico, como el DIDAP.

Reanimação estática do lábio inferior na paralisia facial como complicação de preenchimento / Static lower lip reanimation as a filler complication of facial paralysis

Procedimentos de rejuvenescimento facial substitutos da cirurgia tradicional tornaram-se cada vez mais populares para promover uma aparência jovial com procedimentos minimamente invasivos, como toxina botulínica injetável, preenchimento de tecidos moles e peelings químicos. No entanto, complicações podem ocorrer mesmo na presença de um injetor habilidoso e experiente. Apresentamos o caso de uma paciente submetida a reanimação labial estática usando retalho dermoadiposo para lesão do nervo facial direito após remoção de nódulos como complicação de preenchimento. A "abordagem modificada de bull horn" foi realizada para elevação do lábio superior em torno das asas nasais e columela e ao longo do sulco nasolabial direito. O retalho foi desepitelizado e obtido. Usando a ponta aberta de uma pequena cânula de lipoaspiração, a porção distal do retalho foi encapsulada e fixada diretamente em C-loop e foram utilizados pontos U, transfixando o retalho para o periósteo do arco zigomático. Nos três anos de seguimento não foram observadas complicações significativas e a paciente não relatou nenhuma limitação funcional ou insatisfação com o aspecto das cicatrizes no sulco nasolabial e ao redor das asas nasais e da columela.

Facial rejuvenation procedures to circumvent traditional surgery have become increasingly popular to promote a youthful appearance with minimally invasive procedures such as injectable botulinum toxin, soft-tissue fillers, and chemical peels. Nevertheless, complications can occur even with an astute and experienced injector. Here we present the case of a patient who underwent static lip reanimation using a dermoadiposal flap for right facial nerve damage following nodule removal as a filler complication. A "modified bulls horn approach" to the upper lip lift was performed around the nasal wings and columella and along the right nasolabial fold. The flap was de-epithelized and harvested. Using the open tip of a small liposuction cannula, the distal portion of the flap was tunneled and fixed directly in a C-loop fashion using U stitches, transfixing the flap to the periosteum of the zygomatic arch. At 3 years follow-up, no significant complications were observed, and the patient reported no functional limitations or dissatisfaction with the scars in the nasolabial fold or around the nasal wings and columella.

Development of immunodetection system for botulinum neurotoxin type B using synthetic gene based recombinant protein.

Background & objectives: Botulinum neurotoxins (A-G) are among most poisonous substances in the world, produced by obligate anaerobic bacteria Clostridum botulinum. Among the seven serotypes A, B, E and F are of human importance. In India, the prevalence of C. botulinum as well as botulism outbreaks have been reported. Due to its extreme toxicity it has been classified in the Category A of biological warfare agent. So far, there is no commercial detection system available in India to detect botulism. The present study aims to develop an immuno detection system for botulinum neurotoxin serotype B using synthetic gene approach. Methods: The truncated fragment of the botulinum neurotoxin type B from amino acid 1-450 was synthesized using PCR overlap primers; the constructed gene was cloned in the pQE30UA vector and transformed to Escherichia coli SG 13009. The recombinant protein expression was optimized using various concentration of isopropylthiogalactoside (IPTG) induction, further the expression was confirmed by Western blot analysis using anti-His antibody. Recombinant protein was purified under denatured condition using Ni-NTA affinity chromatography. Antibody was generated against the recombinant protein using alum adjuvant in BALB/c mice and tested for cross reactivity with other serotypes of C. botulinum as well as closely related clostridia. An ELISA test was developed for the detection of botulinum neurotoxin and the minimum detection limit was also estimated. Results: The recombinant protein was expressed at maximum yield at 4.3 h of post-induction with 0.5 mM IPTG concentration. The recombinant protein was purified using Ni-NTA affinity chromatography up to the homogeneity level. The polyclonal antibodies were raised in mice with a titre of 1:2048000. The developed antibody was highly specific with a sensitivity of detecting approximately 15 ng/ml of recombinant protein and not showing any cross-reactivity with other serotypes. Interpretation & conclusions: There is no commercial immunodetection system available in India to detect botulism. The developed detection system is highly specific. It will be useful for growing food industry to detect botulinum neurotoxin in food samples as well as in clinical samples.

Surto familiar de botulismo no estado do Ceará: relato de caso / Familiar outbreak of botulism at Ceará state, Brazil: case report

Relato de surto familiar de botulismo por intoxicação alimentar, envolvendo um óbito, onde foram encontradas lacunas no preenchimento do prontuário. O objetivo foi descrever a patologia chamando a atenção dos profissionais de saúde para o fornecimento adequado de informações relevantes para a investigação epidemiológica de doenças de notificação compulsória.

Report of a family outbreak of botulism food poisoning involving a death, where gaps in the completion of medical records were identified. The study aimed to describe the pathology and emphasize to health professionals the need to provide adequate information relevant to epidemiological investigation of compulsory notification diseases.

Botulism in Brazil, 2000-2008: epidemiology, clinical findings and laboratorial diagnosis / Botulismo no Brasil, 2000-2008: epidemiologia, achados clínicos e diagnóstico laboratorial

Botulism is a rare and potentially lethal illness caused by Clostridium botulinum neurotoxin. We describe the findings of a laboratorial investigation of 117 suspected cases of botulism reported to the surveillance system in Brazil from January 2000 to October 2008. Data on the number and type of samples analyzed, type of toxins identified, reporting of the number of botulism cases and transmission sources are discussed. A total of 193 clinical samples and 81 food samples were analyzed for detection and identification of the botulism neurotoxin. Among the clinical samples, 22 (11.4 percent) presented the toxin (nine type A, five type AB and eight with an unidentified type); in food samples, eight (9.9 percent) were positive for the toxin (five type A, one type AB and two with an unidentified type). Of the 38 cases of suspected botulism in Brazil, 27 were confirmed by a mouse bioassay. Laboratorial botulism diagnosis is an important procedure to elucidate cases, especially food-borne botulism, to confirm clinical diagnosis and to identify toxins in food, helping sanitary control measures.

Botulismo é uma doença rara e potencialmente letal, resultante da ação de uma neurotoxina produzida pelo Clostridium botulinum. No presente estudo, estão descritos os resultados da investigação laboratorial de 117 casos suspeitos de botulismo notificados ao sistema de vigilância, ocorridos no Brasil no período de janeiro de 2000 a outubro de 2008. Os dados obtidos sobre as fontes de transmissão, os tipos de toxina identificados e de amostras analisadas serão discutidos. Foram analisadas 193 amostras clínicas e 81 amostras de alimentos para detecção e identificação de neurotoxina botulínica. Entre as amostras clínicas, 22 (11,4 por cento) amostras apresentaram resultado positivo para toxina (nove do tipo A, cinco do tipo AB e em oito o tipo não foi identificado) e entre as amostras de alimentos, oito (9,9 por cento) foram positivas (cinco do tipo A, uma do tipo AB e em duas o tipo não foi identificado). Dos 38 casos considerados positivos para botulismo, 27 foram confirmados pelo bioensaio em camundongo. O diagnóstico laboratorial de botulismo é importante para elucidação dos casos, principalmente de botulismo alimentar, para confirmação dos diagnósticos clínicos e identificação das toxinas nos alimentos, provendo subsídios para as medidas de controle sanitário.

Linden flower (Tilia spp.) as potential vehicle of Clostridium botulinum spores in the transmission of infant botulism / El té de tilo como vehículo potencial de esporas de Clostridium botulinum en la transmisión del botulismo infantil

Infant botulism is an intestinal toxemia caused principally by Clostridium botulinum. Since the infection occurs in the intestinal tract, numerous food products have been investigated for the presence of C. botulinum and its neurotoxins. In many countries, people use linden flower (Tilia spp) tea as a household remedy and give it to infants as a sedative. Therefore, to help provide a clear picture of this disease transmission, we investigated the presence of botulinum spores in linden flowers. In this study, we analyzed 100 samples of unwrapped linden flowers and 100 samples of linden flowers in tea bags to determine the prevalence and spore-load of C. botulinum. Results were analyzed by the Fisher test. We detected a prevalence of 3% of botulinum spores in the unwrapped linden flowers analyzed and a spore load of 30 spores per 100 grams. None of the industrialized linden flowers analyzed were contaminated with botulinum spores. C. botulinum type A was identified in two samples and type B in one sample. Linden flowers must be considered a potential vehicle of C. botulinum, and the ingestion of linden flower tea can represent a risk factor for infant botulism.

El botulismo del lactante es una toxiinfección causada, principalmente, por Clostridium botulinum. Debido a que esta infección ocurre en el tracto intestinal, la presencia de esta bacteria y sus neurotoxinas ha sido investigada en numerosos alimentos. En muchos países se utiliza el té de tilo (Tilia spp.) como sedante natural, el que se administra incluso a los lactantes. A fin de contribuir al esclarecimiento de la transmisión de esta enfermedad, se investigó la prevalencia y la carga de esporas botulínicas en esta hierba. Se analizaron 100 muestras de tilo comercializado a granel y 100 muestras de tilo industralizado en “saquitos”. Los resultados de prevalencia fueron analizados por el test de Fisher y la carga de esporas por la técnica del número más probable. Se halló una prevalencia de esporas de C. botulinum del 3% en el tilo comercializado a granel, con una carga de 30 esporas/100 g de hierba. En tanto, ninguna de las muestras en saquitos acusó la presencia del patógeno. Se identificaron tres cepas de C. botulinum, dos tipo A y una tipo B. En virtud de estos resultados, el tilo podría considerarse un potencial vehículo de esporas de C. botulinum y la administración de sus infusiones a menores y lactantes, un riesgo para la transmisión de la enfermedad.

Ocorrência e distribuição de esporos de Clostridium botulinum tipos C e D em áreas de criação de búfalos na Baixada Maranhense / Occurrence and distribution of Clostridium botulinum type C and D spores in buffalo breeding areas of the Baixada Maranhense, Maranhão, Brazil

Botulismo é enzoótico na criação de búfalos da Baixada Maranhense, Estado do Maranhão. No presente trabalho foram realizados estudos para verificar a ocorrência e distribuição de esporos de Clostridium botulinum tipos C e D em amostras de solo, limo e fezes de búfalos, colhidas aleatoriamente em áreas inundáveis da criação de búfalos nessa Baixada. A evidenciação de esporos foi realizada em 40 amostras de fezes, 65 de limo e 35 de solo, provenientes de quatro municípios, pelo cultivo em meio de cultura com carne cozida e posterior inoculação do sobrenadante filtrado em camundongo, na tentativa de verificação da presença de toxina botulínica. A tipificação de amostras positivas foi realizada pela microfixação de complemento. Os resultados revelaram que 104 (74,28%) das 140 amostras examinadas foram positivas para a presença de esporos de C. botulinum pelo teste indireto. Não houve diferença significativa (P>0,05) entre os valores obtidos quando das análises das amostras de solo (77,1%), limo (60,0%) e fezes (95,0%). Das 28 amostras de solo, limo e fezes positivas, que foram utilizadas para a tipificação, quatro (14,29%) foram classificadas como tipo C, 23 (82,14%) como tipo D e uma (3,5%) como pertencente ao complexo CD. Os resultados revelaram uma alta contaminação ambiental por C. botulinum em áreas de criação de búfalos da Baixada Maranhense. A identificação de outros tipos e de subtipos de C. botulinum não foi realizada

Clostridium botulinum en suelos de Costa Rica / Clostridium botulinum in Costa Rica soils

Thirty soil samples from the Pacific Dry Forest, the Caribbean lowlands and the Central Plateau of Costa Rica yielded seven cases with botulinal toxins. Of these, five were type C, one A and one B. Type C samples were from the Dry Pacific coastal area, others from the Caribbean lowlands. C. botulinum was isolated from three out of seven positive soil samples. The main reason for the poor recovery of C. botulinum from toxigenic samples is attributable to a low concentration of spores in the samples, because the toxin detection method required ten bacterial spores. An association was found between the presence of C. botulinum and low contents of organic matter (p < 0.05), but not with pH or soil type (p > 0.05).

Botulismo bovino: comprovaçäo laboratorial do diagnóstico clínico, período 1986-1989 / Bovine botulism: laboratorial confirmation of clinical diagnosis during the period 1986-1989

Num período de 4 anos (1986-1989) foram processados 517 materiais correspondentes a 235 casos com diagnóstico clínico de botulismo de bovinos, dos Estados de Säo Paulo, Mato Grosso, Mato Grosso do Sul, Minas Gerais, Goiás, Bahia, Pará, Maranhäo, Distrito Federal e Roraima (Brasil). Exames laboratoriais foram realizados com o intuito de confirmar a suspeita clínica, detectando a toxina nos materiais correspondentes aos casos supracitados. Os tipos de toxina verificados foram "C" e "D" presentes no fígado e conteúdos de estômago e intestinos, que perfaziam o maior número das amostras remetidas. O pequeno número de casos confirmados leva à suposiçäo de que outras enfermidades devem estar envolvidas nessas mortes, ainda que se considere possíveis resultados falso negativos

Botulismo em bovinos confinados provocado pelo consumo de cama de frango contaminada / Botulism in confined bovine caused by the intake contamined poultry litter

O Botulismo é caracterizada por paralisia parcial ou completa dos músculos de locomoçäo, mastigaçäo e deglutinaçäo como resultado da ingestäo de toxinas pré-formadas do C. botulinum. No Brasil, vários casos de botulismo, pelo consumo de restos de carcaça, têm sido descritos (TOKARNIA et al, 1970; SCHOCKEN-ITURRINO, et al, 1990), porém este é o primeiro relato de botulismo em bovinos confinados pelo consumo de cama de frango. Examinaram-se amostras de cama de frango fornecidos em um confinamento, situado no Município de Jaboticabal-SP, onde tinham morrido vários animais com sintomas sugestivos de botulismo. Amostras dos alimentos fornecidos foram submetidos a análise microbiológica, mascerando-se 500 g das amostras em soluçäo salina estéril. Alíquotas de 0,1 ml da suspensäo foram semeadas em placas de Agar Sangue, Agar MacConkey, Agar Triptose soja e Agar para Clostridios e incubadas a 37§ C por 24 horas em aerobiose e anaerobiose com Sistema Gaspak (BBL). Das mesmas suspensöes foram realizadas também extraçöes de toxinas, em gelatina tamponada. Após centrifugaçäo, foram inoculadas em camundongos. Os resultados mostraram a presença de toxina botulínica do tipo "C", depois da soroneutralizaçäo, com antitoxina botulínica do Instituto Pasteur de Paris. Na cama de frango foram encontrados fragmentos de pé de aves. Este é o primeiro surto de botulismo em bovinos confinados devido a ingestäo de cama de frango

Clostridium botulinum tipos D y A en materiales de necropsia de bovinos afectados por el mal de Aguapey / Clostridium botulinum type D and A in necropsy materials of bovines affected by Aguapey disease

Se realizaron exámenes bacteriológicos en materiales de necropsia de cinco animales muertos con diagnóstico clínico de botulismo bovino, enfermedad enzoótica regional llamada Mal de Aguapey (Provincia de Corrientes). Se identificó C. botulinum tipo D o su toxina en todos los animales, alternativamente en contenidos de rumen, yeyuno, íleon y ciego, y en muestras obtenidas de bazo, riñon e hígado. C. botulinum tipo A fue identificado, respectivamente, en hígado y riñón de dos animales. En los cultivos de cien muestras de diferentes tipos de suelo tomados en el área enzoótica, se identificó toxina butulínica sólo del tipo A en tres y en ninguna tipo D. Estos resultados amplían y confirman los hallazgos previos realizados sobre la etiología botulínica del Mal de Aguapey

Primer brote de botulismo por Clostridium botulinum subtipo Af / First outbreak by Clostridium botulinum subtype Af

En diciembre de 1982 ocurrió un brote de botulismo en San Rafael (Mendoza) ocasionado presuntamente por la ingestión de escabeche de trucha de preparación casera. La toxina detectada en suero sanguíneo y heces del único paciente afectado fue preliminarmente tipificada como del serotipo A. De las heces se aisló una cepa de Clostridium botulinum que produjo 1 x 10**7D150/ratón por ml de toxina. Las pruebas de neutralización cuantitativas demostraron que la toxina está integrada por una fración principal del tipo A (alrededor del 99% del complejo) y una fracción menor del tipo F, definiendo así su identidad serológica como subtipo Af. La antitoxina correspondiente preparada por inmunización de conejos neutralizó las toxinas A y F de referencia. El paciente falleció como consecuencia de la intoxicación a pesar del tratamiento antitóxico y de apoyo. El suero polivalente administrado contenía antitoxinas A, B y E. Esta es la primera detección de un brote de botulismo producido por C. botulinum subtipo Af, serotipo reconocido por primera vez en Argentina hace 15 años. Su distribución y frecuencia en la naturaleza sumado a la presencia del serotipo F también patógeno para el hombre, exige una revisión de las antitoxinas botulínicas polivalentes utilizadas en nuestro país, que no contienen antitoxina F en su composición